Diferenciación de bacterias grampositivas y gramnegativas al microscopio.
2. Fundamento.
La tinción de Gram es una tinción diferencial que permite saber la morfología, tamaño y agrupamiento de las bacterias, además de dividir a las bacterias en dos grupos, grampositivas y gramnegativas, según el color del que se tiñen.
3. Medidas de seguridad.
- Guantes.
- Bata.
- Mechero.
4. Material.
- Portaobjetos.
- Microscopio.
- Pipetas pasteur.
- Asa de siembra.
- Mechero.
- Agua del grifo.
- Suero fisiológico.
5. Muestra y reactivos.
- Muestras 5 y 8.
- Cristal violeta.
- Lugol.
- Mezcla de 70% Alcohol- 30% cetona.
- Safranina.
6. Protocolo.
- Ponemos una gota de suero fisiológico en un portaobjetos.
- Esterilizamos el asa de siembra en el mechero y cogemos una muestra de nuestros tubos y realizamos una extensión junto con el suero fisiológico.
- Fijamos con calor.
- Cubrimos la extensión con cristal violeta y incubamos 1 minuto.
- Decantamos y lavamos con agua del grifo.
- Cubrimos la extensión con lugol y incubamos 1 minuto.
- Decantamos y lavamos con agua del grifo.
- Cubrimos la extensión con la mezcla de alcohol-cetona y incubamos 30 segundos.
- Decantamos y lavamos con agua de grifo.
- Cubrimos la extensión con safranina y incubamos 2 minutos.
- Decantamos y lavamos con agua del grifo.
- Secamos a Tª ambiente o con un secador y observamos al microscopio.
7. Resultados.
- Muestra 5:
En nuestra muestra nº 5 podemos observar bacilos grampositivos.
- Muestra 8:
En nuestra muestra nº 8 podemos observar bacilos gramnegativos.
