Determinar si la bacteria es resistente o sensible a antibióticos.
2. Fundamento.
Un antibiograma permite determinar la sensibilidad o resistencia de una cepa bacteriana frente a un grupo de antibióticos.
3. Medidas de seguridad.
- Guantes.
- Bata.
- Mechero.
4. Material.
- Placa de petri.
- Discos de antibiótico.
- Asa de siembra.
- Tubos de ensayo.
- Micropipeta.
- Pinzas.
- Vaso de precipitado.
- Mechero.
- Asa de digalsky.
- Cartulina negra.
5. Reactivos y muestra.
- Etanol.
- Suero fisiológico.
- Muestras 5 y 8.
- Patrón 0,5 escala de McFarland.
6. Protocolo.
- Echamos en un tubo suero fisiológico.
- Cogemos una muestra con el asa y depositamos en el suero fisiológico hasta conseguir la misma turbidez que en el patrón 0,5 de la escala de McFarland.
- Con la micropipeta, tomamos 100μl de la muestra y la depositamos en el centro de la placa de petri.
- Cogemos el asa de digalsky y la sumergimos en un vaso de precipitado con etanol. Esterilizamos con el mechero.
- Extendemos con el asa la muestra por la placa. Volvemos a sumergir el asa en etanol y esterilizamos.
- A continuación cogemos las pinzas y repetimos el mismo proceso para esterilizar que con el asa.
- Cogemos los discos de antibiótico y los depositamos en la placa.
- Volvemos a esterilizar las pinzas.
- Incubar en la estufa 24h y observar el resultado.
- El resultado se obtiene midiendo el diámetro del halo.
7. Resultado.
- Muestra 5:
- Antibióticos presentes: Clindamicina (CD), Chloranphenicol (C), Cefazolín (CZ) y Neomycina (N).
- Diámetros obtenidos:
+ Clindamicina (CD): 30 mm
+ Chloranphenicol (C): 25 mm
+ Cefazolín (CZ): 0 mm
+ Neomycina (N): 15 mm
- Resultado:
+ Clindamicina (CD): Sensible
+ Chloranphenicol (C): Sensible
+ Cefazolín (CZ): Resistente
+ Neomycina (N): Sensibilidad intermedia
- Muestra 8:
- Antibióticos presentes: Chloranphenicol (C), Cefazolín (CZ), Neomycina (N) y Penicilina (PG).
- Diámetros obtenidos:
+ Chloranphenicol (C): 23 mm
+ Cefazolín (CZ): 0 mm
+ Neomycina (N): 16 mm
+ Penicilina (PG): 0 mm
- Resultado:
+ Chloranphenicol (C): Sensible
+ Cefazolín (CZ): Resistente
+ Neomycina (N): Sensibilidad intermedia
+ Penicilina (PG): Resistente
