sábado, 3 de marzo de 2018

ESCALA DE MCFARLAND

1. Objetivo.

En esta práctica prepararemos la Escala de McFarland, cuya utilidad es estimar la densidad bacteriana de una suspensión.

2. Fundamento.

Prepararemos la escala mezclando ácido sulfúrico al 1% con cloruro de bario al 1,175% en cantidades diferentes, dependiendo de a qué patrón corresponda.

3. Medidas de seguridad.

- Guantes.
- Bata.
- Cabina de bioseguridad.

4. Material.

- Tubos de ensayo.
- Matraz de 500ml y 50ml.
- Pipetas de cristal.
- Vaso de precipitado.
- Embudo.
- Agua destilada.
- Varilla de cristal.
- Vidrio de reloj.
- Báscula.

5. Reactivos y muestra.

- Ácido sulfúrico al 1%.
- Cloruro de bario al 1,175%.

6. Cálculos.

  • Matraz 500ml con H2SO4 al 1%:

             Vo x Co = VF x CF

              Vo x 98 = 500 x 1

           Vo = 5,102 ml de H2SO4 

       500 - 5,102 = 494,897 ml de agua destilada

  • Matraz 50ml con BaCl2 al 1,175%:
            Vo x Co = VF x CF

          Vo x 100 = 50 x 1,175

          Vo = 0,587 ml de BaCl2

         50 - 0,587 = 49,4 ml de agua destilada
  • Llenado de tubos:

Patrón
H2SO4 al 1%
BaCl2 al 1,175%
0,5
= 24,875 ml

25 ml – 24,875 = 0,125 ml
1
= 24,75 ml

25 ml – 24,75 = 0,25 ml
2
= 24,5 ml

25 ml – 24,5 = 0,5 ml
3
= 24,25 ml

25 ml – 24,25 = 0,75 ml
4
= 24 ml

25 ml – 24 = 1 ml
5
= 23,75 ml

25 ml – 23,75 = 1,25 ml
6
= 23,5 ml

25 ml – 23,5 = 1,5 ml
7
= 23,25 ml

25 ml – 23,25 = 1,75 ml
8
= 23 ml

25 ml – 23 = 2 ml
9
= 22,75 ml

25 ml – 22,75 = 2,25 ml
10
= 22,5 ml

25 ml – 22,5 = 2,5 ml

7. Protocolo.

  • Matraz de H2SO4:
  1. Encendemos la cabina.
  2. Echamos un poco de H2SO4 en un vaso de precipitado y agua destilada en otro vaso.
  3. Tomamos con la pipeta de cristal de 5,10 ml de H2SO4 y lo añadimos al vaso de precipitado que contiene agua destilada.
  4. Removemos con la varilla de cristal y añadimos, posteriormente, al matraz con la ayuda de un embudo.
  5. Terminamos de enrasar con agua destilada.
  • Matraz de BaCl2:
  1. Pesamos 0,587 gr de BaCl2 en la báscula.
  2. Añadimos un poco de agua destilada en el matraz de 50 ml.
  3. Añadimos el BaCl2 en el matraz con ayuda de agua destilada.
  4. Terminamos de enrasar con agua destilada y homogeneizamos.
  • Llenado de tubos:
  1. Cogeremos 11 tubos de ensayo.
  2. Llenamos cada tubo con 25 ml (total de ambas cantidades de H2SO4 y BaCl2).


8. Resultado.